細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染防控全攻略——從預(yù)防到處理的系統(tǒng)化指南
2025-11-21
細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染防控全攻略——從預(yù)防到處理的系統(tǒng)化指南一、支原體污染的危害與識別隱性威脅:支原體無細(xì)胞壁,可穿透0.22μm濾膜,常規(guī)抗生素(如青霉素)無效,常導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢、形態(tài)異常(如“空泡化”)、實(shí)驗重復(fù)性差,甚至基因表達(dá)譜改變。快速檢測:熒光染色法:使用染色,支原體DNA在紫外光下呈“星點(diǎn)狀”熒光。PCR檢測:針對支原體16SrRNA基因設(shè)計引物(如通用引物),靈敏度達(dá)10CFU/mL,3-4小時出結(jié)果。培養(yǎng)法:將細(xì)胞上清接種于支原體培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)14天,觀察...
細(xì)胞治療血清的保存和活性維護(hù)指南
2025-11-20
細(xì)胞治療血清的保存和活性維護(hù)指南細(xì)胞治療血清保存流程與關(guān)鍵要點(diǎn)1.溫度分級精準(zhǔn)管理長期保存:需儲存于-20℃至-80℃低溫環(huán)境,優(yōu)先選擇-70℃超低溫冰箱以大化活性保留,保存期限可達(dá)數(shù)年。血清結(jié)冰體積膨脹約10%,分裝時須預(yù)留10%空間(如50mL管裝45mL),避免凍裂污染。短期使用:4℃冷藏不超過1個月,超期易激活補(bǔ)體系統(tǒng),導(dǎo)致免疫細(xì)胞(如T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞)非特異性凋亡。2.分裝與解凍規(guī)范操作分裝策略:按單次用量分裝為10-50mL小份,標(biāo)注“批次+日期+溫度”,避免反復(fù)...